Διαφορά μεταξύ HPLC και LCMS | HPLC vs. LCMS
Διαφορά κλειδιού - HPLC vs LCMS
Ας εξετάσουμε πρώτα την έννοια της HPLC και LCMS προτού αναλύσουμε τη διαφορά μεταξύ HPLC και LCMS. Η χρωματογραφία είναι μια τεχνική διαχωρισμού στη χημική ανάλυση όπου τα συστατικά του δείγματος διαχωρίζονται κατά τη διάρκεια της διέλευσης μέσω ενός χρωματογραφικού μέσου. Επίσης περιλαμβάνει αλληλεπίδραση με το δείγμα, τη στατική φάση και την κινητή φάση. Η HPLC σημαίνει Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Απόδοσης, και χρησιμοποιείται ως μέθοδος υγρής χρωματογραφίας στην αναλυτική χημεία. Ο συνδυασμός υγρής χρωματογραφίας και φασματοσκοπίας μάζας (LCMS) έχει αναπτυχθεί για την ποσοτική ανάλυση επιλεγμένων βιομορίων και είναι μια ιδιαίτερα ευαίσθητη, ακριβής και ειδική διαδικασία ανάλυσης σε σύγκριση με την HPLC . Αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ HPLC και LCMC . Αυτό το άρθρο θα σας εισάγει στην HPLC και LCMC που ασχολούνται με τη χημική ανάλυση και θα συζητήσουν τις διαφορές μεταξύ HPLC και LCMS.
Τι είναι η HPLC;
Η υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) είναι μια δημοφιλής τεχνική διαχωρισμού στην αναλυτική χημεία . Χρησιμοποιείται κυρίως για τον διαχωρισμό των συστατικών, για τον προσδιορισμό και την ποσοτικοποίηση κάθε συστατικού σε μείγμα . Νωρίτερα, αυτή η μέθοδος ήταν γνωστή ως υγρή χρωματογραφία υψηλής πίεσης , επειδή εξαρτάται από τις αντλίες να ρέουν υγρό διαλύτη υπό πίεση που περιλαμβάνει το μείγμα δείγματος μέσω στήλης γεμάτης με ένα στερεό προσροφητικό υλικό. Κάθε συστατικό στο μείγμα δειγμάτων αλληλεπιδρά διαφορετικά με το στερεό προσροφητικό υλικό, με αποτέλεσμα διαφορετικούς ρυθμούς ροής για διαφορετικά συστατικά. Αυτό μπορεί να οδηγήσει στον διαχωρισμό των συστατικών καθώς ρέουν έξω από τη στήλη HPLC. -
Η HPLC χρησιμοποιήθηκε για διάφορεςεφαρμογές όπως ανάλυση των επιπέδων βιταμίνης D στο αίμα , ανίχνευση των καταλοίπων φαρμάκων στα ούρα τους, ταξινόμηση των συστατικών ενός σύνθετου βιολογικού δείγματος για ερευνητικούς σκοπούς και ανάλυση και παρασκευή φαρμακευτικών προϊόντων .
HPLC-MS
.Η LCMS είναι μια κυρίαρχη αναλυτική τεχνική η οποία έχει πολύ υψηλή ακρίβεια, ευαισθησία και ειδικότητα σε σύγκριση με την HPLC. Έτσι, είναι χρήσιμο σε πολλές εφαρμογές όπως ερευνητικούς σκοπούς, ανάλυση φαρμάκων, ανάλυση τροφίμων, κτλ. Η LCMS χρησιμοποιείται κυρίως για τον διαχωρισμό, ανίχνευση, ταυτοποίηση και ποσοτικοποίηση των βιοχημικών ιδιοτήτων ενός συγκεκριμένου δείγματος παρουσία σύνθετα χημικά μείγματα. Ποια είναι η διαφορά μεταξύ HPLC και LCMC ; Ακρωνύμιο και ορισμός HPLC και LCMC HPLC:
Η HPLC αντιπροσωπεύει Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Απόδοσης. Είναι μια τεχνική διαχωρισμού που χρησιμοποιείται κυρίως για τον διαχωρισμό των συστατικών, για τον εντοπισμό και την ποσοτικοποίηση κάθε συστατικού σε ένα μείγμα. LCMS: LCMS σημαίνει
Υγρή Χρωματογραφία και Φασματομετρία Μάζας. Πρόκειται για μια αναλυτική τεχνική που συνδυάζει τις φυσικές ιδιότητες διαχωρισμού της υγρής χρωματογραφίας με τις ικανότητες ανάλυσης μάζας της φασματομετρίας μάζας (MS).
Χαρακτηριστικά HPLC και LCMC
Ταξινόμηση HPLC: Πρόκειται μόνο για τη μέθοδο υγρής χρωματογραφίας.
LCMS: Πρόκειται για ένα συνδυασμό μεθόδου υγρής χρωματογραφίας και μεθόδου φασματομετρίας μάζας.
Αποδοτικότητα
HPLC: Σε σύγκριση με το LCMS, η ανάλυση HPLC είναι λιγότερο αποτελεσματική και πιο αργή.
LCMS: Σε σύγκριση με την HPLC, η ανάλυση LCMS είναι αποτελεσματική και ταχύτερη.
Ευαισθησία
HPLC: Σε σύγκριση με την LCMS, η ανάλυση HPLC είναι λιγότερο ευαίσθητη.
LCMS: Σε σύγκριση με την HPLC, η ανάλυση LCMS είναι πιο ευαίσθητη.
Ειδικότητα
HPLC: Σε σύγκριση με το LCMS, η ανάλυση HPLC είναι λιγότερο συγκεκριμένη.
LCMS: Σε σύγκριση με την HPLC, η ανάλυση LCMS είναι πιο συγκεκριμένη
.
Ακρίβεια HPLC:
Η HPLC δίνει λιγότερο ακριβή αποτελέσματα από την LCMS για τον προσδιορισμό ορισμένων χημικών ουσιών. LCMS: Η LCMS δίνει ακριβέστερα αποτελέσματα από την HPLC για τον προσδιορισμό ορισμένων χημικών ουσιών.
Συστατικό
HPLC: Η HPLC μπορεί να θεωρηθεί ως συστατικό της LCMS.
LCMS: Η LCMS δεν μπορεί να θεωρηθεί ως συστατικό της HPLC.
Πηγή ιόντων
HPLC: Η πηγή ιονισμού δεν υπάρχει σε όργανο HPLC.
LCMS: Η πηγή ιόντων υπάρχει στο όργανο LCMS.
Εφαρμογές
HPLC: Ιόντα, πολυμερή, οργανικά μόρια και βιομόρια μπορούν να αναλυθούν χρησιμοποιώντας HPLC.
LCMS: Μπορούν να αναλυθούν οργανικά μόρια και βιομόρια. Σε αντίθεση με την HPLC, μπορεί να χρησιμοποιηθεί LCMS για να εξεταστούν ατελείωτα διαλυμένα μίγματα.
Λειτουργία
HPLC: Το διάγραμμα ενός οργάνου HPLC δίδεται στο σχήμα 1 και συνήθως περιλαμβάνει αυτόματο δειγματολήπτη, αντλίες και ανιχνευτή. Ο δειγματολήπτης εισάγει το μείγμα δείγματος στην κινητή φάση (μίγμα υπό πίεση διαλυτών όπως νερό, ακετονιτρίλιο και / ή μεθανόλη) το οποίο το μεταφέρει στη στήλη. Οι αντλίες παρέχουν την επιθυμητή ροή και τη σύνθεση της κινητής φάσης μέσω της στήλης. Η στήλη γεμίζεται με το προσροφητικό, το οποίο είναι ένα κοκκώδες στερεό σωματίδιο όπως το διοξείδιο του πυριτίου ή πολυμερή. Ο ανιχνευτής παράγει ένα σήμα αναλογικό προς την ποσότητα της παρουσίας του συστατικού του δείγματος στη στήλη, επιτρέποντας έτσι την ποσοτικοποιήσιμη ανάλυση των επιλεγμένων συστατικών του δείγματος.Το όργανο HPLC ελέγχεται και η ανάλυση δεδομένων παρέχεται από ψηφιακό μικροεπεξεργαστή και λογισμικό χρήστη.
Σχήμα 1: Διάγραμμα οργάνου HPLC
LCMS:
Το διάγραμμα του οργάνου LCMS δίνεται στο σχήμα 2. Το εκχύλισμα δείγματος εισάγεται στη στήλη που αποτελείται από HPLC. Αυτή η στήλη διατηρεί δείγματα μεταβολιτών με βάση φυσικούς χαρακτήρες και οι διάφοροι μεταβολίτες ρέουν στο φασματόμετρο μάζας σε διαφορετικά χρονικά διαστήματα. Η φασματοσκοπία μάζας χρησιμοποιείται για την εκτίμηση των μαζών σωματιδίων, για τον προσδιορισμό της στοιχειακής διάταξης ενός μορίου και για τη διευκρίνιση των δομών του μορίου. Εντούτοις, το δείγμα θα πρέπει να ιονίζεται για να δημιουργήσει φορτισμένα μόρια προκειμένου να προσδιοριστούν οι λόγοι μάζας προς φορτίο. Επομένως, αντί για όργανα HPLC, τα LCMS αποτελούνται από τρία πρόσθετα στοιχεία όπως η πηγή σιδήρου, ένας αναλυτής μάζας και ένας ανιχνευτής. Μια πηγή ιόντων μπορεί να μετασχηματίσει το δείγμα αερίου φάσης σε ιόντα και έναν αναλυτή μάζας που ομαδοποιεί τα ιόντα από τις μάζες τους χρησιμοποιώντας ηλεκτρομαγνητικά πεδία. Τέλος, ένας ανιχνευτής ποσοτικοποιεί τις τιμές και παραδίδει δεδομένα κάθε ιόντος που υπάρχει στο δείγμα. Η τεχνική LCMS μπορεί να χρησιμοποιηθεί τόσο για ποιοτικές όσο και για ποσοτικές εφαρμογές. Σχήμα 2:
Διάγραμμα του οργάνου LCMS Συμπερασματικά, η HPLC είναι μέθοδος υγρής χρωματογραφίας ενώ η LCMS είναι ένας συνδυασμός υγρής χρωματογραφίας και φασματομετρίας μάζας. Και οι δύο αυτές τεχνικές ανάλυσης έχουν διαφορετικά χαρακτηριστικά, αλλά μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ταυτοποίηση και τον ποσοτικό προσδιορισμό συνθέσεων τροφίμων, φαρμάκων και άλλων βιοδραστικών μορίων.
Αναφορές Arpino, Ρ. (1992). Φασματομετρία μάζας συνδυασμένης υγρής χρωματογραφίας. Μέρος ΙΙΙ. Εφαρμογές θερμοψεκασμού. Reviews 11
: 3. Gerber, F., Krummen, Μ. 2004). Πρακτικές πτυχές της υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης μεγάλης απόδοσης με αντίστροφη φάση, χρησιμοποιώντας στήλες με σωματίδια συσκευασμένες σε 3μm και μονολιθικές στήλες για φαρμακευτική ανάπτυξη και παραγωγή που λειτουργούν σύμφωνα με τις ισχύουσες ορθές πρακτικές παρασκευής. Εφημερίδα της Χρωματογραφίας
1036 (2): 127-133. Lee, Μ. S. and Kerns, Ε. Η. (1999). Οι εφαρμογές LC / MS στην ανάπτυξη φαρμάκων. Αξιολογήσεις Φασματομετρίας Μάζας , 18 (3-4): 187-279. Murray, Κ. Κ. (1997). Απορρόφηση / ιονισμός με λέιζερ με συζευγμένη μήτρα συζεύξεως σε υγρούς διαχωρισμούς. Κριτικές φασματομετρίας μάζας 16 (5): 283. Η ευγένεια εικόνας: "Hplc" από τον αρχικό χρήστη ήταν Kjaergaard at en. wikipedia - Μεταφορά από την. wikipedia. (Δημόσιος τομέας) μέσω Commons
