Διαφορά μεταξύ νιτροκυτταρίνης και PVDF | Νιτροκυτταρίνη έναντι PVDF

Διαφορά κλειδιού - Νιτροκυτταρίνη έναντι PVDF

Το Western blotting είναι μια μέθοδος που επιτρέπει την ανίχνευση και ποσοτικοποίηση συγκεκριμένων πρωτεϊνών από δείγμα πρωτεΐνης. Η αξιοπιστία της τεχνικής εξαρτάται από την επιλογή μιας σωστής μεμβράνης για την απορρόφηση πρωτεϊνών από το πήκτωμα. Υπάρχουν διάφοροι τύποι μικροπορωδών μεμβρανών. Οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης και PVDF είναι δύο τέτοιες μεμβράνες που προτιμούν οι ερευνητές λόγω των ιδιαίτερων χαρακτηριστικών τους έναντι των άλλων τύπων μεμβρανών. Η επιλογή μεταξύ της νιτροκυτταρίνης ή του PVDF είναι επίσης μία άλλη πρόκληση στην κηλίδωση Western. Τόσο νιτροκυτταρίνη όσο και PVDF έχουν υψηλή ικανότητα απορρόφησης πρωτεϊνών. Η βασική διαφορά μεταξύ της μεμβράνης νιτροκυτταρίνης και PVDF είναι ότι οι μεμβράνες της νιτροκυτταρίνης δεν έχουν την ικανότητα να απογυμνώσουν τα αντισώματα και να επαναχρησιμοποιήσουν τη μεμβράνη για την ανατίναξη των αντισωμάτων, ενώ οι μεμβράνες PVDF έχουν ικανότητα απογύμνωσης και επαναχρησιμοποίησης .

ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΑ

1. Επισκόπηση και διαφορά κλειδιού

2. Τι είναι η νιτροκυτταρίνη

3. Τι είναι PVDF

4. Σύγκριση μεταξύ των πλευρών - Νιτροκυτταρίνη έναντι PVDF

5. Περίληψη

Τι είναι η νιτροκυτταρίνη;

Η νιτροκυτταρίνη είναι ένα πολυμερές που παράγεται με την επεξεργασία κυτταρίνης με νιτρικό οξύ και χρησιμοποιείται για τη δημιουργία μικροπορωδών μεμβρανών στη μοριακή βιολογία, ειδικά για τις τεχνικές στυπώματος όπως η νότα, το βόρειο και το western blotting. Τα μεγέθη πόρων των μεμβρανών νιτροκυτταρίνης κυμαίνονται από 3 έως 20 μm. Οι μικροπορώδεις μεμβράνες νιτροκυτταρίνης διευκολύνουν την ανίχνευση της ανοσοχημικής αντίδρασης που συμβαίνει στην επιφάνεια της μεμβράνης. Ως εκ τούτου, οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης χρησιμοποιούνται συχνά για ακινητοποίηση πρωτεϊνών και ανίχνευση ειδικών πρωτεϊνών σε κηλίδωση Western. Οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης μπορούν επίσης να ακινητοποιήσουν τις γλυκοπρωτεΐνες και τα νουκλεϊνικά οξέα.

Οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης προτιμώνται σε δοκιμές πλευρικής ροής λόγω διαφόρων χαρακτηριστικών. Οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης απορροφούν τις πρωτεΐνες σε υψηλή συγκέντρωση. Ο διαλύτης που χρησιμοποιείται για τη διαβροχή της μεμβράνης δεν μειώνει την απορρόφηση της πρωτεΐνης μεμβράνης νιτροκυτταρίνης. Οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης μπορούν να κοπούν εύκολα στο επιθυμητό μέγεθος πηκτής και να μεταφέρουν πρωτεΐνες από το πήκτωμα στη μεμβράνη με ηλεκτρική ή τριχοειδή μεταφορά. Η νιτροκυτταρίνη επιτρέπει ταχύτερη ροή πρωτεϊνών μέσω της μεμβράνης με υψηλό δυναμικό σύνδεσης. Η νιτροκυτταρίνη παρουσιάζει βελτιωμένη αντοχή στον χειρισμό. Ένα άλλο ιδιαίτερο χαρακτηριστικό της μεμβράνης νιτροκυτταρίνης είναι ότι μπορεί εύκολα να κολληθεί με ανθεκτικά στο νερό μέσα συγκόλλησης σε διάφορα πλαστικά υποστρώματα.

Εικόνα 01: Μεμβράνη νιτροκυτταρίνης για στύπωση western

Τι είναι το PVDF;

Το διφθοριούχο πολυβινυλιδένιο (PVDF) είναι φθοροπολυμερές που παράγεται από τον πολυμερισμό διφθοριούχου βινυλιδενίου και έχει υψηλή ικανότητα ακινητοποίησης πρωτεϊνών. Επομένως, οι μικροπορώδεις μεμβράνες που κατασκευάζονται από PVDF χρησιμοποιούνται σε τεχνικές στυπώματος western για την ανάλυση συγκεκριμένων πρωτεϊνών από τα μείγματα πρωτεϊνών. Οι μεμβράνες PVDF μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν για ανάλυση αμινοξέων και αλληλούχιση πρωτεϊνών. Το πιο σημαντικό χαρακτηριστικό της μεμβράνης PVDF πάνω από τη μεμβράνη νιτροκυτταρίνης είναι ότι μπορεί εύκολα να απογυμνωθεί από τα αντισώματα και να επαναχρησιμοποιηθεί για επακόλουθους ανιχνευτές αντισωμάτων.

Οι μεμβράνες PVDF είναι παχύτερες από τις μεμβράνες νιτροκυτταρίνης. ως εκ τούτου, πιο ανθεκτικά σε ζημιές κατά την επαναχρησιμοποίηση. Οι μεμβράνες PVDF είναι εξαιρετικά υδρόφοβες. Επομένως, πρέπει να εμποτιστούν με μεθανόλη ή με ισοπροπανόλη πριν από τη χρήση.

Ποια είναι η διαφορά μεταξύ Νιτροκυτταρίνης και PVDF;

- diff Άρθρο Μέση πριν από τον πίνακα ->

Νιτροκυτταρίνη έναντι PVDF
Η νιτροκυτταρίνη είναι ένα πολυμερές που αποτελείται από κυτταρίνη.	Το PVDF είναι ένα φθοροπολυμερές που παράγεται από τον πολυμερισμό διφθοριούχου βινυλιδενίου.
Μέγεθος πόρου μεμβράνης
Τα τυπικά μεγέθη πόρων είναι 0. 1, 0. 2 ή 0. 45μ	Τα τυπικά μεγέθη πόρων είναι 0. 1, 0. 2 ή 0. 45μm
> Η νιτροκυτταρίνη έχει ικανότητα σύνδεσης πρωτεΐνης 80 έως 100 μg / cm
2 . Η PVDF έχει ικανότητα σύνδεσης πρωτεΐνης 170 έως 200 μg / cm	2 . Ευαισθησία
Αυτό έχει χαμηλή ευαισθησία σε σύγκριση με το PVDF.
Αυτό έχει υψηλή ευαισθησία.	Ανίχνευση πρωτεϊνών χαμηλής έκφρασης
Εφόσον η ευαισθησία είναι χαμηλή σε μεμβράνες νιτροκυτταρίνης, δεν είναι κατάλληλη για ανίχνευση πρωτεϊνών χαμηλής έκφρασης.
Αυτό είναι πιο κατάλληλο για την ανίχνευση πρωτεϊνών χαμηλής έκφρασης λόγω της υψηλής ευαισθησίας του.	Ιστορικό θόρυβος
Αυτό έχει χαμηλότερο θόρυβο φόντου
Αυτό έχει υψηλότερο θόρυβο φόντου.	Αλληλεπιδράσεις με πρωτεΐνες
Τα μόρια πρωτεϊνών δεσμεύονται με μεμβράνες νιτροκυτταρίνης μέσω υδρόφοβων αλληλεπιδράσεων.
Οι πρωτεΐνες συνδέονται με μεμβράνες PVDF μέσω αλληλεπιδράσεων υδρόφοβων και διπόλων.	Φύση της μεμβράνης
Η νιτροκυτταρίνη είναι εύθραυστη και εύθραυστη. Ωστόσο, είναι διαθέσιμες εκδόσεις νιτροκυτταρίνης και είναι ανθεκτικές.
Το PVDF είναι πιο ανθεκτικό και έχει μεγαλύτερη χημική αντοχή.	Δυνατότητα απογύμνωσης και επαναχρησιμοποίησης
Η νιτροκυτταρίνη ενδέχεται να έχει δυσκολία στην απογύμνωση και την καταστροφή χωρίς να χάσει το σήμα.
Το PVDF είναι ιδανικό για εφαρμογές ανατίμησης και ακολουθίας.	Καταλληλότητα
Η νιτροκυτταρίνη είναι ιδανική για την ανίχνευση πρωτεϊνών χαμηλού μοριακού βάρους.
Το PVDF είναι πιο κατάλληλο για την ανίχνευση πρωτεϊνών υψηλότερου μοριακού βάρους.	Άλλες χρήσεις
Η νιτροκυτταρίνη μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανάλυση νουκλεϊκού οξέος και την κηλίδωση κηλίδας / σχισμής.
Το PVDF μπορεί να χρησιμοποιηθεί για συστήματα προσδιορισμού αλληλουχίας πρωτεϊνών και δοκιμασίας στερεάς φάσης.	Κόστος
Αυτό είναι φθηνότερο από τις μεμβράνες PVDF.
Αυτό είναι ακριβότερο από τις μεμβράνες νιτροκυτταρίνης.	Ανάγκη για προ-διαβροχή
Οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης δεν απαιτούν προδιάθεση με μεθανόλη
Οι μεμβράνες PVDF απαιτούν προδιάθεση με μεθανόλη.	Περίληψη - Νιτροκυτταρίνη έναντι PVDF

Οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης ήταν οι πρώτες μεμβράνες που χρησιμοποιήθηκαν εμπορικά για δοκιμασία πλευρικής ροής. Έχουν μεγάλη ικανότητα απορρόφησης πρωτεϊνών. Ως εκ τούτου, μεμβράνες νιτροκυτταρίνης χρησιμοποιούνται σε κηλίδωση Western. Το PVDF είναι ένας άλλος τύπος μεμβράνης που χρησιμοποιείται στη στύπωση western και έχει επίσης υψηλή απορροφητική ικανότητα πρωτεϊνών. Και οι δύο τύποι χρησιμοποιούνται σε κηλίδωση Western για ανάλυση πρωτεϊνών. Ωστόσο, οι μεμβράνες PVDF έχουν περισσότερες ειδικές ιδιότητες, καθιστώντας τους πιο κατάλληλες από τις μεμβράνες νιτροκυτταρίνης για στύπωση western. Όμως, οι μεμβράνες νιτροκυτταρίνης είναι περισσότερο κατάλληλες για την ανίχνευση πρωτεϊνών χαμηλού μοριακού βάρους, οι μεμβράνες PVDF είναι πιο κατάλληλες για την ανίχνευση υψηλού μοριακού βάρους πρωτεϊνών. Αυτή είναι η διαφορά μεταξύ μεμβρανών νιτροκυτταρίνης και PVDF.

Ευγένεια εικόνας:

1. "Μεταφορά στυπώματος Western" Από το Bensaccount στην αγγλική Wikipedia (CC BY 3. 0) μέσω Wikimedia Commons

Αναφορά:

1. Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun και Thomas A. Neubert. "Χρήση Μεμβρανών Νιτροκυτταρίνης για Χαρακτηρισμός Πρωτεϊνών με Φασματομετρία Μάζας με Υποβοηθούμενη από Matrix Φασματομετρία Μάζας Απορρόφησης / Ιονισμού. " Αναλυτική Χημεία. Εθνική Βιβλιοθήκη της Ιατρικής του Ηνωμένου Βασιλείου, 15 Ιουλίου 2006. Web. 28 Μαρτίου 2017

2. "Μοριακοί δείκτες και φυτική βιοτεχνολογία. "Βιβλία Google. Ν. Ρ., n. ρε. Ιστός. 28 Μαρτίου 2017

3. Δευτέρα, 8 Απριλίου 2013 Tweet. "Η μαγεία στη μεμβράνη: Επιλέξτε σοφά για τα αποτελέσματα Best Western Blot. "Biocompare. Ν. Ρ., 08 Απρ. 2013. Web. 28 Μαρτίου 2017