Διαφορά μεταξύ τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης και ηλεκτροφόρησης πηκτώματος | Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση έναντι ηλεκτροφόρησης γέλης
Διαφορά κλειδιού - Ηλεκτροφόρηση τριχοειδούς με ηλεκτροφόρηση
Η ηλεκτροφόρηση είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για το διαχωρισμό βιομορίων με βάση το φορτίο σωματιδίων, και το σχήμα των σωματιδίων. Η μετανάστευση του μορίου, γνωστή ως ηλεκτροφορητική κινητικότητα , εξαρτάται από τον τύπο του χρησιμοποιούμενου πολυμερούς / πηκτής, το μέγεθος του πόρου του, την παρεχόμενη τάση, το χρόνο λειτουργίας και την αναλογία επιφάνειας προς όγκο. Υπάρχουν διαφορετικοί τύποι τεχνικών ηλεκτροφόρησης που βασίζονται στον τύπο βιομορίου που χρησιμοποιείται. Ο πρώτος τύπος ηλεκτροφορήσεως που εφευρέθηκε ήταν η ηλεκτροφόρηση του χαρτιού όπου χρησιμοποιήθηκε χαρτί νιτροκυτταρίνης ως μέσο διαχωρισμού βιομορίων. Η αρχή της ηλεκτροφόρησης πηκτής όπου χρησιμοποιούνται πηκτές διαφορετικού μεγέθους πόρου για τον διαχωρισμό βιομορίων, επινοήθηκε αργότερα. Η τεχνική ηλεκτροφόρησης πηκτής τροποποιήθηκε περαιτέρω για να βελτιωθεί η ακρίβεια της τεχνικής και μία τέτοια τροποποίηση είναι η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση. Η βασική διαφορά μεταξύ της τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης και της ηλεκτροφόρησης πηκτής είναι ότι η ηλεκτροφόρηση πηκτής εκτελείται σε ένα κατακόρυφο ή οριζόντιο επίπεδο χρησιμοποιώντας πολυμερή γέλη τυπικού μεγέθους πόρου ενώ η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση εκτελείται σε τριχοειδή σωλήνα με πολυμερές υγρό ή πήκτωμα.
ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΑ
1. Επισκόπηση και διαφορά κλειδιού
2. Τι είναι ηλεκτροφόρηση γέλης
3. Τι είναι η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση
4. Ομοιότητες μεταξύ τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης και ηλεκτροφόρησης γέλης
5. Συγκριτική σύγκριση - Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση έναντι ηλεκτροφόρησης πηκτής σε μορφή πίνακα
6. Περίληψη
Τι είναι η ηλεκτροφόρηση πηκτής;
Η ηλεκτροφόρηση πηκτής είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό κυρίως νουκλεϊνικών οξέων, πρωτεϊνών ή αμινοξέων με βάση το φορτίο, το μέγεθος και το σχήμα τους. Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί ένα φυσικό πήκτωμα, το οποίο είναι μια πολυμερική ουσία, ως μέσο διαχωρισμού. Τα πιο συχνά χρησιμοποιούμενα πηκτώματα είναι η αγαρόζη (για διαχωρισμό νουκλεϊκού οξέος) και το πολυακρυλαμίδιο (για διαχωρισμό πρωτεϊνών). Η ηλεκτροφορητική συσκευή πηκτής περιέχει το δίσκο χύτευσης πηκτής για την προετοιμασία του πηκτώματος, χτένες χύτευσης για την προετοιμασία των φρεατίων, δεξαμενή απομόνωσης, ηλεκτρόδια - θετική (άνοδος) και αρνητική (κάθοδος) και μονάδα τροφοδοσίας τάσης.Μόρια όπως το DNA ή το RNA, τα οποία είναι αρνητικά φορτισμένα, κινούνται από την κάθοδο στην άνοδο και τα μόρια που είναι θετικά φορτισμένα κινούνται αντίστροφα. Η προετοιμασία του πηκτώματος γίνεται σύμφωνα με την απαίτηση. Εάν απαιτείται υψηλή ανάλυση ή διαχωρισμός μορίων, πρέπει να παρασκευαστεί πηκτή υψηλής συγκέντρωσης με μικρότερο μέγεθος πόρων. Τα μόρια που διαχωρίζονται στη μήτρα πήγματος παρατηρούνται μετά από μία τεχνική χρώσης. Τα διαχωρισμένα μόρια εμφανίζονται σαν ζώνες στη μήτρα πηκτής.
Εικόνα 01: Ηλεκτροφόρηση πηκτώματος
Η ηλεκτροφόρηση πηκτής χρησιμοποιείται σε μοριακές διαγνωστικές μεθόδους όπως η αποτύπωση δακτυλικών αποτυπωμάτων DNA για τον προσδιορισμό της παρουσίας συγκεκριμένου θραύσματος DNA / RNA ή πρωτεΐνης. Η ηλεκτροφόρηση του πηκτώματος καθορίζει επίσης την καθαρότητα του δείγματος βιομορίου που έχει εξαχθεί. Η ηλεκτροφόρηση πηκτής εκτελείται ως ένα προκαταρκτικό βήμα για την υβριδοποίηση και ως επιβεβαιωτική ανάλυση μετά την αλληλούχιση.
Η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση είναι μια τροποποίηση της ηλεκτροφόρησης πηκτής η οποία χρησιμοποιεί την ίδια αρχή διαχωρισμού με βάση το φορτίο, το μέγεθος του μορίου, αλλά εκτελείται σε τριχοειδή σωλήνα είτε με ουσία πηκτής είτε με υγρό πολυμερές. Τα τριχοειδή παρασκευάζονται από συντηγμένο διοξείδιο του πυριτίου και κάθε τριχοειδής σωλήνας έχει εσωτερική διάμετρο 50-100 μm και μήκος 25-100 cm. Τα δείγματα εγχέονται εντός του τριχοειδούς σωλήνα που περιέχει το πολυμερές υλικό και διαχωρίζονται πολύ γρήγορα από την συμβατική ηλεκτροφόρηση πηκτής. Το τριχοειδές σύστημα είναι καλά προστατευμένο μέσα σε ένα μανδύα μονωτήρα που προστατεύει το δείγμα από οποιαδήποτε μόλυνση. Τα τριχοειδή αγγεία μπορούν να πληρωθούν με υγρά πολυμερή όπως υδροξυαιθυλοκυτταρίνη ή πηκτές υψηλής ανάλυσης όπως το πολυακρυλαμίδιο. Η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση παρέχει μεγαλύτερη ανάλυση. επομένως ο διαχωρισμός είναι ακριβέστερος. Η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση χρησιμοποιεί ένα αυτοματοποιημένο σύστημα ανιχνευτή μέσω φασματοφωτομετρικής ανάλυσης. Αυτό οφείλεται στον υψηλότερο λόγο επιφάνειας προς όγκο.
Εικόνα 02: Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση
Η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση χρησιμοποιείται σε καταστάσεις όπως στην ιατροδικαστική όπου απαιτείται υψηλότερη ακρίβεια και δεν χρησιμοποιείται συνήθως καθώς είναι δαπανηρή τεχνική.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης και ηλεκτροφόρησης πηκτώματος;
Ο διαχωρισμός των μορίων και στις δύο τεχνικές βασίζεται στο φορτίο και το μέγεθος του μορίου.
- Και οι δύο τεχνικές μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον διαχωρισμό τόσο των νουκλεϊνικών οξέων όσο και των πρωτεϊνών.
- Ο όγκος του δείγματος και των δύο τεχνικών είναι ο ίδιος.
- Και οι δύο τεχνικές χρησιμοποιούν ένα buffer για να διευκολύνουν το διαχωρισμό.
- Ποια είναι η διαφορά μεταξύ τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης και ηλεκτροφόρησης πηκτώματος;
- diff Άρθρο Μέση πριν από τον πίνακα ->
Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση vs ηλεκτροφόρηση πηκτώματος
Η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση είναι μια τεχνική που διαχωρίζει τα βιομόρια σε έναν τριχοειδή σωλήνα χρησιμοποιώντας ένα υγρό ή πολυμερές μέσο γέλης. |
|
| Η ηλεκτροφόρηση πηκτής είναι μια τεχνική που διαχωρίζει τα βιομόρια σε ένα κατακόρυφο ή οριζόντιο επίπεδο χρησιμοποιώντας ένα μέσο πολυμερούς πηκτής. | Διαχωρισμός |
| Στην τριχοειδή ηλεκτροφόρηση, ο διαχωρισμός γίνεται μέσα σε τριχοειδή σωλήνα. | |
| Στην ηλεκτροφόρηση πηκτής, ο διαχωρισμός γίνεται σε κατακόρυφο ή οριζόντιο επίπεδο. | Μέσο διαχωρισμού |
| Υγρά πολυμερή όπως η υδροξυαιθυλοκυτταρίνη χρησιμοποιούνται στην τριχοειδή ηλεκτροφόρηση. | |
| Τα πηκτώματα, είτε αγαρόζη είτε πολυακρυλαμίδιο, χρησιμοποιούνται ως μέσο ηλεκτροφόρησης πηκτής. | Διασταυρούμενη σύνδεση |
| Υψηλή ανάλυση μπορεί να ληφθεί από τριχοειδή ηλεκτροφόρηση. | |
| Η ανάλυση είναι χαμηλή σε ηλεκτροφόρηση πηκτής. | Δείκτης επιφάνειας προς όγκο |
| Ο λόγος επιφάνειας προς όγκο είναι υψηλός στην τριχοειδή ηλεκτροφόρηση. | |
| Ο λόγος επιφάνειας προς όγκο είναι χαμηλός στην ηλεκτροφόρηση πηκτής. | Τεχνική ανίχνευσης |
| Η ανίχνευση γίνεται μέσω φασματοφωτομετρικών αυτόματων ανιχνευτών στην τριχοειδή ηλεκτροφόρηση. | |
| Η χρώση και η παρατήρηση μέσω διαφραγμάτων υπεριωδών ακτίνων γίνεται ως τεχνικές ανίχνευσης στην ηλεκτροφόρηση πηκτής. | Περίληψη - Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση έναντι ηλεκτροφόρησης πηκτώματος |
Η μοριακή διάγνωση διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στον επιστημονικό κόσμο. Η αναγνώριση και ο καθαρισμός του ϋΝΑ, του RNA και των πρωτεϊνών είναι κρίσιμα βήματα στις διαγνωστικές διαδικασίες. Η ηλεκτροφόρηση είναι μια τεχνική που διαχωρίζει και ταυτοποιεί τα βιομόρια τόσο στην ηλεκτροφόρηση πηκτής όσο και στην πολύ προηγμένη τριχοειδή ηλεκτροφόρηση σε πήκτωμα. Η ηλεκτροφόρηση πηκτώματος εκτελείται σε κατακόρυφο ή οριζόντιο επίπεδο χρησιμοποιώντας πολυμερή γέλη τυπικού μεγέθους πόρου ενώ η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση εκτελείται σε τριχοειδή σωλήνα με πολυμερές υγρό ή πήκτωμα. Αυτή είναι η διαφορά μεταξύ τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης και ηλεκτροφόρησης πηκτώματος. Με την ολοκλήρωση της τεχνικής ηλεκτροφόρησης, τα βιομόρια επεξεργάζονται περαιτέρω για να αποκτήσουν πληροφορίες υψηλότερου επιπέδου μέσω υβριδισμού ή μέσω τεχνικών όπως η λήψη δακτυλικών αποτυπωμάτων.
Κατεβάστε το PDF της Τριχοειδούς Ηλεκτροφόρησης vs Ηλεκτροφόρηση Πηκτής
Μπορείτε να κατεβάσετε την έκδοση PDF αυτού του άρθρου και να το χρησιμοποιήσετε για σκοπούς εκτός σύνδεσης σύμφωνα με την παραπομπή. Παρακαλώ κατεβάστε εδώ την έκδοση PDF εδώ. Διαφορά μεταξύ ηλεκτροφόρησης πηκτής και τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης.
Αναφορές:
1. Durney, Brandon C., et αϊ. "Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση που εφαρμόζεται στο DNA: προσδιορισμός και αξιοποίηση αλληλουχίας και δομής για την προώθηση βιοαναλύσεων (2009-2014). "Αναλυτική και Βιοαναλυτική Χημεία, Springer Berlin Heidelberg, 2015, Διατίθεται εδώ. Πρόσβαση στις 28 Αυγούστου 2017.
2. "Ηλεκτροφόρηση. "Πανεπιστήμιο του Leicester, 8 Ιανουαρίου 2009, Διατίθεται εδώ. Πρόσβαση στις 28 Αυγούστου 2017.
3. "Ηλεκτροφόρηση γέλης. "Khan Academy, διαθέσιμο εδώ. Έγινε πρόσβαση στις 28 Αυγούστου 2017.
Ευγένεια εικόνας:
1. "Ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης DNA" από τη Σχολή Φυσικών Πόρων της Ann Arbor - εργαστήριο DNA (CC BY 2. 0) μέσω Wikimedia Commons
2. «Σχηματική διάταξη ηλεκτροφόρησης τριχοειδούς γέλης» Από Chem4066sp13 - Ίδια εργασία (CC BY-SA 3. 0) μέσω Wikimedia Commons
