Διαφορά μεταξύ YAC και M13 Vector φάγου | YAC vs M13 Vector φάγου

Διαφορά κλειδιού - Ο διαχωρισμός των κυττάρων YAC έναντι του M13

Η κλωνοποίηση του DNA είναι μια σημαντική διαδικασία που επιτρέπει τη διάδοση σημαντικών θραυσμάτων DNA οργανισμών. Απαιτεί σύνδεση ειδικού DNA με φορέα DNA για τη δημιουργία ανασυνδυασμένου DNA που μετασχηματίζεται στον ξενιστή οργανισμό. Ένας φορέας είναι ένα μόριο ϋΝΑ το οποίο συμπεριφέρεται ως όχημα για μεταφορά ξένου γενετικού υλικού σε άλλο κύτταρο ή οργανισμό. Θα πρέπει να είναι ικανό να αναδιπλασιαστεί εντός του οργανισμού ξενιστή και να παράγει πολλαπλά αντίγραφα ανασυνδυασμένου DNA. Υπάρχουν διαφορετικά είδη φορέων που χρησιμοποιούνται στην κλωνοποίηση του DNA. Το τεχνητό χρωμόσωμα ζυμομυκήτων (YAC) και ο φορέας φάγου Μ13 είναι δύο τύποι μεταξύ τους. Η διαφορά κλειδί μεταξύ φορέα YAC και M13 φάγου είναι ότι το YAC είναι ένα τεχνητό χρωμόσωμα το οποίο αναπαράγεται σε κύτταρα ζυμομύκητα ενώ ο φορέας φάγου M13 είναι ένα μονόκλωνο κυκλικό DNA βακτηριοφάγου Μ13 το οποίο αναπαράγεται σε Coli.

ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΑ

1. Επισκόπηση και διαφορά κλειδιού

2. Τι είναι το YAC

3. Τι είναι το M13 Φάγιο Vector

4. Συγκριτική παράσταση - YAC vs M13 Φάγιο

5. Περίληψη

Τι είναι ένα YAC Vector;

Το YAC είναι ένα τεχνητά κατασκευασμένο χρωμόσωμα το οποίο έχει την ικανότητα να μεταφέρει ένα μεγάλο τμήμα ξένου DNA και να αναδιπλασιαστεί μέσα στα κύτταρα ζύμης. Έχει κεντρομερή, τελομερή και αυτόνομα επαναλαμβανόμενες αλληλουχίες απαραίτητες για αναπαραγωγή και σταθερότητα. Το YAC θα πρέπει επίσης να φέρει έναν επιλεκτικό δείκτη ή δείκτες και θέσεις περιορισμού για να καταστεί ένας αποτελεσματικός φορέας κλωνοποίησης. Μεγάλες ακολουθίες που κυμαίνονται από 1000 kb έως 2000 kb μπορούν να εισαχθούν στο YAC και να μεταφερθούν σε ζύμη.

Εικόνα 01: Vector YAC

Τι είναι ο M13 Phage Vector;

Το βακτηριοφάγο M13 είναι ένας ιός που μολύνει και αναπαράγει σε

E Coli. Το γονιδίωμα του Μ13 βακτηριοφάγου είναι μικρού μεγέθους, περίπου 6,7 kb. Είναι ένα μονοκλωνικό, κυκλικό και θετικό νόημα DNA. Αυτός ο ιός ειδικά μολύνει βακτήρια E Coli μέσω του F pilus. Μόλις εισέλθει στο ssDNA στο βακτήριο, συνθέτει τον συμπληρωματικό του κλώνο και γίνεται dsDNA ή η αντιγραφική μορφή (RF) του Μ13. Το RF μπορεί να συμπεριφέρεται σαν πλασμίδιο εντός του οργανισμού ξενιστή. Το dsDNA αναδιπλασιάζεται εντός Ε Coli και παράγει ssDNA που φέρει νέους φάγους. Αυτοί οι νέοι φάγοι απελευθερώνονται συνεχώς από το E Coli χωρίς να σκοτωθεί το κύτταρο ξενιστή. Ωστόσο, η λοίμωξη επιβραδύνει την ανάπτυξη του E Coli. Το dsDNA μπορεί να εξαχθεί από βακτηριακά κύτταρα και να χρησιμοποιηθεί ως φορείς στην κλωνοποίηση ϋΝΑ.Είναι γνωστοί ως φορείς φάγου Μ13. Αυτά μπορούν εύκολα να χρησιμοποιηθούν και να χρησιμοποιηθούν όμοια με τους πλασμιδικούς φορείς. Η εγγενής ικανότητα μόλυνσης αυτών των φάγων Μ13 χρησιμεύει ως καλό χαρακτηριστικό για να χρησιμοποιηθεί ως φορέας στη γονιδιακή κλωνοποίηση. Όταν αναπτύσσεται το Μ13 σε ένα φορέα, αρκετά στοιχεία θα πρέπει να ενσωματωθούν στο γονιδίωμα του. Αυτά είναι ένα γονίδιο για την πρωτεΐνη λακ καταστολέα (lac Ι), την περιοχή εγγύς χειριστή του γονιδίου

lacZ

, έναν προαγωγό lac και μια πολλαπλή θέση κλωνοποίησης (πολυσυνδετήρας). Όταν το dsDNA του Μ13 χρησιμοποιείται ως φορείς, μπορεί να αντιμετωπιστεί ως φορέας πλασμιδίου. Εντούτοις, η χρήση του ssDNA Μ13 έχει πλεονεκτήματα στην αλληλούχιση του DNA και τη μεταλλαξογένεση που κατευθύνεται σε θέση. Δεδομένου ότι ο φορέας φάγου Μ13 φέρει πολλαπλή περιοχή κλωνοποίησης σε περιοχή lacZ, ανασυνδυασμένοι φορείς μπορούν εύκολα να ταυτοποιηθούν με διαλογή μπλε / λευκής αποικίας σε πλάκες άγαρ που περιέχουν IPTG και X-Gal. Οι μπλε πλάκες που παράγονται στις πλάκες δεν περιέχουν τους ανασυνδυασμένους φάγους. Συνεπώς, φάγοι με ένθετα μπορούν να επιλεγούν για τον σκοπό της κλωνοποίησης. Εικόνα 02: Βακτηριοφάγος M13 Ποια είναι η διαφορά μεταξύ YAC και M13 Φάγου Vector;

- diff Άρθρο Μέσο πριν από τον πίνακα ->

YAC vs M13 Φάγιο Vector

Το YAC είναι ένα γενετικά τροποποιημένο χρωμόσωμα το οποίο έχει την ικανότητα να μεταφέρει ένα μεγάλο τμήμα ξένου DNA και να αναδιπλασιαστεί μέσα στα κύτταρα ζύμης.

Ο φορέας φάγου Μ13 είναι ένας ιικός φορέας που αναπτύχθηκε από βακτηριοφάγο Μ13 που χρησιμοποιείται για την εισαγωγή ξένου DNA σε
Ε Coli.	Σκοπός Τα YAC σχεδιάστηκαν για να κλωνοποιήσουν μεγάλα θραύσματα γονιδιωματικού DNA σε ζύμη.
Οι φορείς φάγου Μ13 χρησιμοποιούνται για την εισαγωγή ξένου DNA σε
Ε Coli.	Εισαγωγή Μήκος Τα YACs μπορούν να περιέχουν γονιδιωματικά ένθετα μεγέθους megabase (1000 kb - 2000 kb).
Το μέγεθος των παρεμβλημάτων είναι περίπου 1, 500 bps.
Κατασκευή	Το YAC DNA είναι δύσκολο να καθαριστεί άθικτο και απαιτεί υψηλή συγκέντρωση για τη δημιουργία συστήματος φορέων YAC.
Εμφανίζεται μέσω κυκλικής φωτοσυνθετικής αλυσίδας ηλεκτρονίων.
Σταθερότητα	Το YAC είναι ασταθές.
Οι φάγοι M13 μπορούν εύκολα να εξαχθούν.
Μέγεθος	Τα ένζυμα είναι μεγαλύτερα μόρια.
Οι φάγοι M13 είναι σταθεροί από το YAC.
Περίληψη - YAC vs M13 Φάγιο Vector	Το YAC είναι ένα τεχνητά κατασκευασμένο σύστημα φορέα που χρησιμοποιεί μια συγκεκριμένη περιοχή του χρωμοσώματος ζύμης για να εισάγει μεγάλα τμήματα γενετικού υλικού σε κύτταρα ζύμης. Ο φορέας φάγου Μ13 είναι ένα σύστημα φορέα που προέρχεται από βακτηριοφάγο Μ13 που χρησιμοποιεί

Ε coli

ως οργανισμό ξενιστή. Αυτή είναι η κύρια διαφορά μεταξύ YAC και M13 Phage Vector. Και οι δύο είναι εξίσου χρήσιμες στην τεχνολογία ανασυνδυασμένου DNA και στην κλωνοποίηση γονιδίων. Αναφορά: 1. "Διάνυσμα. "Γενετική-σημειώσεις - Vector. Ν. Ρ., n. ρε. Ιστός. 16 Μαΐου 2017. // genetics-notes. wikispaces. com / Vector

2. "Τεχνητό χρωμόσωμα ζύμης. "Wikipedia. Ίδρυμα Wikimedia, 21 Απριλίου 2017. Ιστός. 16 Μαΐου 2017..

Ευγένεια εικόνας:

1. "M13B" Από J3D3 - δική του δουλειά (CC BY-SA 3. 0) μέσω Wikimedia