Διαφορά μεταξύ ηλεκτροφόρησης πηκτής και σελίδας SDS | Ηλεκτροφόρηση πηκτώματος εναντίον SDS Σελίδα

Διαφορά κλειδιού - Ηλεκτροφόρηση πηκτώματος vs SDS Σελίδα

Η ηλεκτροφόρηση πηκτής είναι μια τεχνική που διαχωρίζει τα μακρομόρια σε ένα ηλεκτρικό πεδίο. Είναι μια κοινή μέθοδος στη Μοριακή Βιολογία για το διαχωρισμό DNA, RNA και πρωτεϊνών από μίγματα σύμφωνα με τα μοριακά τους μεγέθη. Η σελίδα SDS είναι ένας τύπος ηλεκτροφόρησης πηκτής που χρησιμοποιείται για τη διαίρεση πρωτεϊνών από ένα μείγμα πρωτεϊνών με βάση τα μεγέθη τους. Η ηλεκτροφόρηση πηκτής είναι ένας όρος που χρησιμοποιείται για να αναφερθεί στην κανονική τεχνική που εφαρμόζεται για τον διαχωρισμό DNA, RNA και πρωτεϊνών ενώ η SDS Page είναι ένας τύπος ηλεκτροφόρησης πηκτής. Αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ της ηλεκτροφόρησης πηκτής και της σελίδας SDS.

ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΑ

1. Επισκόπηση και διαφορά κλειδιού

2. Τι είναι ηλεκτροφόρηση γέλης

3. Τι είναι η σελίδα SDS

4. Σύγκριση μεταξύ των πλευρών - Ηλεκτροφόρηση πηκτής έναντι SDS Σελίδα

5. Περίληψη

Τι είναι η ηλεκτροφόρηση πηκτής;

Η ηλεκτροφόρηση του πηκτώματος είναι μια κοινή τεχνική που χρησιμοποιείται στα εργαστήρια για το διαχωρισμό φορτισμένων μορίων όπως το DNA, το RNA, οι πρωτεΐνες κ.λπ. από τα μίγματα αυτών. Ένα πήκτωμα χρησιμοποιείται στην ηλεκτροφόρηση πηκτής. Λειτουργεί ως μοριακό κόσκινο. Υπάρχουν δύο τύποι πηκτωμάτων που χρησιμοποιούνται στην ηλεκτροφόρηση πηκτής, συγκεκριμένα αγαρόζη και πολυακρυλαμίδιο. Η επιλογή ενός πηκτώματος και παρασκευής πηκτής είναι σημαντικοί παράγοντες που πρέπει να ληφθούν υπόψη στις ηλεκτροφόρες πηκτές καθώς το μέγεθος πόρων του πηκτώματος θα πρέπει να χειρίζεται προσεκτικά για έναν καλό διαχωρισμό μορίων μέσω ηλεκτροφόρησης πηκτής. Η ηλεκτροφόρηση πηκτής έχει ένα ηλεκτρικό πεδίο συνδεδεμένο με τα δύο άκρα της γέλης. Το ένα άκρο της γέλης δείχνει θετικό φορτίο ενώ το άλλο άκρο είναι αρνητικά φορτισμένο.

Το DNA και το RNA είναι αρνητικά φορτισμένα μόρια. Μόλις φορτωθούν στο πήκτωμα από το αρνητικό άκρο της γέλης και εφαρμοστούν στο ηλεκτρικό πεδίο, μεταναστεύουν μέσω των πόρων του πηκτώματος προς το θετικά φορτισμένο άκρο της γέλης. Η ταχύτητα της μετανάστευσης εξαρτάται από το φορτίο και το μέγεθος του μορίου. Μικρότερα μόρια εύκολα μεταναστεύουν μέσω των πόρων του πηκτώματος από τα μεγαλύτερα μόρια. Ως εκ τούτου, μικρότερα μόρια ταξιδεύουν σε μεγάλη απόσταση μέσω του πηκτώματος και τα μεγαλύτερα μόρια ταξιδεύουν σε μικρή απόσταση. Για να παρατηρηθεί η μετακίνηση μορίων στο πήκτωμα, χρησιμοποιούνται ειδικοί τύποι βαφών. Το ηλεκτρικό πεδίο εφαρμόζεται για μια ορισμένη χρονική περίοδο και σταματάει για να αποτρέψει την απώλεια μορίων και να κρατήσει τα μόρια στις διαδρομές τους. Διαφορετικές ζώνες μπορούν να παρατηρηθούν στο πήκτωμα.Αυτές οι ζώνες αντιπροσωπεύουν τα μόρια διαφορετικών μεγεθών. Ως εκ τούτου, η ηλεκτροφόρηση πηκτής είναι χρήσιμη για τη διαφοροποίηση των μορίων ανάλογα με τα μεγέθη τους.

Η ηλεκτροφόρηση του πηκτώματος ενσωματώνεται σε διάφορες τεχνικές ως προπαρασκευαστική τεχνική στη Μοριακή Βιολογία όπως η PCR, η RFLP, η κλωνοποίηση, η αλληλούχιση του DNA, η κηλίδωση του νότου, η χαρτογράφηση του γονιδιώματος κλπ.

Εικόνα 01: Γέλη αγαρόζης ηλεκτροφόρηση

Τι είναι η σελίδα SDS;

Ηλεκτροφόρηση πηκτής δωδεκυλοθειικού πολυακρυλαμιδίου

(σελίδα SDS) είναι ένας τύπος ηλεκτροφόρησης πηκτής που χρησιμοποιείται για τη διαίρεση πρωτεϊνών. Όταν χρησιμοποιείται ηλεκτροφόρηση πηκτής για τη διαίρεση πρωτεϊνών, απαιτούνται ειδικές επεξεργασίες, καθώς οι πρωτεΐνες δεν είναι αρνητικά φορτισμένες όπως το DNA και το RNA και δεν μεταναστεύουν προς το θετικό ή το αρνητικό άκρο. Συνεπώς, οι πρωτεΐνες μετουσιώνονται και επικαλύπτονται με αρνητικό φορτίο πριν από την ηλεκτροφόρηση σε πήκτωμα. Αυτό γίνεται χρησιμοποιώντας απορρυπαντικό που ονομάζεται δωδεκυλοθειικό νάτριο (SDS). Η ηλεκτροφόρηση πηκτής που χρησιμοποιεί SDS και πηκτή πολυακρυλαμιδίου για το μέσο υποστήριξης είναι γνωστή ως SDS Page. Αυτή η τεχνική χρησιμοποιείται συνήθως στη βιοχημεία, τη γενετική, την εγκληματολογία και τη μοριακή βιολογία. Κατά τη διάρκεια της σελίδας SDS, οι πρωτεΐνες αναμειγνύονται με SDS. Το SDS ξεδιπλώνει τις πρωτεΐνες σε γραμμικό σχήμα και τις επικαλύπτει με αρνητικό φορτίο ανάλογο με τη μοριακή τους μάζα. Λόγω του αρνητικού φορτίου, τα πρωτεϊνικά μόρια μεταναστεύουν προς το θετικό τέλος της γέλης και διαχωρίζονται ανάλογα με τη μοριακή τους μάζα. Στη σελίδα SDS, χρησιμοποιείται το πολυακρυλαμίδιο ως το στερεό υποστήριγμα για το πήκτωμα. Ο πραγματικός διαχωρισμός των πρωτεϊνών εξαρτάται κυρίως από τις ιδιότητες του πηκτώματος. Συνεπώς, η παρασκευή πηκτής πολυακρυλαμιδίου θα πρέπει να γίνει προσεκτικά και θα πρέπει να χρησιμοποιηθούν σωστές συγκεντρώσεις πολυακρυλαμιδίου. Τα πηκτώματα πολυακρυλαμιδίου παρουσιάζουν υψηλή ανάλυση από τα πηκτώματα αγαρόζης. Ως εκ τούτου, η σελίδα SDS θεωρείται τεχνική υψηλής ανάλυσης για τον διαχωρισμό πρωτεϊνών.

Η σελίδα SDS είναι ένας τύπος ηλεκτροφόρησης μετουσιωτικής πηκτής. Έχει σημαντικό περιορισμό στην ανάλυση πρωτεϊνών. Δεδομένου ότι το SDS μετουσιώνει τις πρωτεΐνες πριν από το διαχωρισμό, δεν επιτρέπει την ανίχνευση ενζυματικής δραστηριότητας, αλληλεπιδράσεις δέσμευσης πρωτεΐνης, συμπαράγοντες πρωτεϊνών κλπ.

Εικόνα 02: σελίδα SDS

Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της ηλεκτροφόρησης πηκτής και της σελίδας SDS;

- diff Άρθρο Μέση πριν από τον πίνακα ->

Ηλεκτροφόρηση πηκτώματος έναντι SDS Σελίδα

Η ηλεκτροφόρηση πηκτής είναι μια μέθοδος που εκτελείται για τη διάσπαση μακρομορίων χρησιμοποιώντας ένα ηλεκτρικό πεδίο.
Η σελίδα SDS είναι μια τεχνική ηλεκτροφόρησης πηκτής υψηλής ανάλυσης που χρησιμοποιείται για τη διαίρεση πρωτεϊνών με βάση τη μάζα τους.	Εκτέλεση γέλης
Μπορεί να γίνει σε οριζόντιο ή κάθετο τρόπο.
Η σελίδα SDS εκτελείται κάθετα.	Βάση διαχωρισμού
Ο διαχωρισμός συμβαίνει ανάλογα με το φορτίο και το μέγεθος.
Ο διαχωρισμός πρωτεϊνών συμβαίνει ανάλογα με τη μάζα και το φορτίο.	Ανάλυση
Η ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης έχει χαμηλή ανάλυση και η ηλεκτροφόρηση πηκτής πολυακρυλαμιδίου έχει υψηλότερη ανάλυση
Η σελίδα SDS έχει καλύτερη ανάλυση.	Μετουσίωση
Η ηλεκτροφόρηση του πηκτώματος περιλαμβάνει τόσο τεχνικές μετουσίωσης όσο και μη μετουσιωτικές τεχνικές.
Η σελίδα SDS μετουσιώνει τις πρωτεΐνες πριν από το διαχωρισμό.	Περίληψη - Ηλεκτροφόρηση γέλης έναντι SDS Σελίδα

Η ηλεκτροφόρηση πηκτής είναι μια κοινή τεχνική που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό και την ανάλυση του DNA, RNA και πρωτεϊνών με βάση το μέγεθος και το φορτίο τους. Υπάρχουν δύο κύριοι τύποι ηλεκτροφόρησης πηκτώματος, συγκεκριμένα ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης και ηλεκτροφόρηση πηκτής πολυακρυλαμιδίου. Τα πηκτώματα αγαρόζης χρησιμοποιούνται κυρίως για διαχωρισμό νουκλεϊνικών οξέων. όταν απαιτείται μεγαλύτερη ανάλυση, χρησιμοποιούνται πηκτές πολυακρυλαμιδίου. Η σελίδα SDS είναι ένας τύπος ηλεκτροφόρησης πηκτής που χρησιμοποιείται συνήθως για τον διαχωρισμό σύνθετων μειγμάτων πρωτεϊνών. Θεωρείται ως τεχνική διαχωρισμού πρωτεϊνών υψηλής ανάλυσης. Αυτή είναι η διαφορά μεταξύ της ηλεκτροφόρησης πηκτής και της σελίδας SDS.

Αναφορές:

1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig και David H. Petering. "Φυσική SDS-PAGE: Ηλεκτροφορητικός διαχωρισμός πρωτεϊνών υψηλής ανάλυσης με συγκράτηση φυσικών ιδιοτήτων συμπεριλαμβανομένων των δεσμευμένων μεταλλικών ιόντων. www. ncbi. nlm. nih. gov. Ν. Ρ., Μάιος 2014. Ιστός. 7 Απριλίου 2017

2. Stellwagen, Nancy C. "Ηλεκτροφόρηση DNA σε πηκτώματα αγαρόζης, πηκτές πολυακρυλαμιδίου και σε ελεύθερο διάλυμα. "Ηλεκτροφόρηση. U.S. National Library of Medicine, Ιούνιος 2009. Web. 07 Απριλίου 2017

Ευγένεια εικόνας:

1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) μέσω Wikimedia Commons

2. "Ηλεκτροφόρηση πηκτής Agarose DNA" από την Σχολή Φυσικών Πόρων από το Ann Arbor - εργαστήριο DNA (CC BY 2. 0) μέσω Wikimedia Commons